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黃大茶降血糖化合物的探究

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糖尿病是一種以餐后持續高血糖為特征的慢性代謝性疾病,可引起高脂血癥、動脈粥樣硬化、心血管疾病和腎功能衰竭等嚴重并發癥,主要特征有血糖升高和胰島素抗藥性,餐后碳水化合物的水解是血糖的主要來源,因此有必要抑制餐后碳水化合物的快速水解,以防止體內葡萄糖水平過高。 α-葡萄糖苷酶是一類水解酶,可以促進葡萄糖苷鍵的斷裂,釋放出葡萄糖從而使血糖升高,被認為是潛在的糖尿病靶標,抑制該酶的活性會延緩糖類物質的消化和分解,從而降低葡萄糖進入血液的速率,達到有效緩解和治療糖尿病目的。

黃大茶產自安徽省六安市霍山縣,是一種經過高火烘焙的黃茶,其“拉老火”工藝是黃大茶最為特殊和重要的一道工序,高溫烘焙不僅賦予黃大茶獨特的香氣和滋味,還顯著提升了其降糖的生物活性。安徽農業大學茶葉國家重點實驗室研究結果表明,黃大茶相比其它茶類能夠顯著降低小鼠的血糖水平,且經過拉老火后的黃大茶的 α-葡萄糖苷酶抑制效果顯著提升,但其中關鍵活性化合物尚不明確。

為了探究黃大茶中的重要降糖活性化合物, 安徽農業大學吳悠、宛曉春教授*和張梁教授*等采用溶劑萃取、色譜分離和分析化學技術對黃大茶及其不同溶劑萃取部位進行研究,以糖類水解酶活性抑制率進一步追蹤黃大茶中關鍵降糖活性化合物,隨后通過波譜學解析關鍵化合物的結構,最后采用液相制備分離的方法對比每種化合物的生物活性,篩選出其中具有較高 α-葡萄糖苷酶抑制活性化合物。

活性組分檢測及其作用機理探究

體外α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性的實驗結果表明,黃大茶茶湯的乙酸乙酯萃取部位的酶活抑制能力最佳,隨后對該部位進行了熒光猝滅效應檢測,證實了乙酸乙酯層化合物能夠使α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶上的發色基團猝滅,蛋白(α-葡萄糖苷酶)互作實驗表明其中的化合物可以靜態結合與動態碰撞的方式抑制酶的活性,隨后的分子模擬實驗結果也驗證了蛋白互作實驗的結果。

關鍵化合物篩選

為快速篩選乙酸乙酯層中關鍵的酶活抑制化合物,使用LC-Q-TOF-MS/MS鑒定出了其中31 個主要化合物,并用液相制備分離,分別檢測其 α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,結果表明N-乙基-2-吡咯烷酮取代的黃烷-3-醇類物質具有較強的酶活抑制率的特點,因此初步判定該類化合物為黃大茶中抑制 α-葡萄糖苷酶的活性化合物。

黃大茶的5 種溶劑萃取部位中,乙酸乙酯部位對 α-葡萄糖苷酶抑制活性最高;熒光檢測結果和蛋白互作篩選實驗結果表明活性化合物可以通過靜態結合與動態碰撞兩種方式抑制酶活并使發色基團失活且分子對接實驗驗證了該部分實驗結果;對活性部位的化合物分別進行鑒定和酶活抑制率的檢測發現EPSFs類化合物含量很低卻具有較高的 α-葡萄糖苷酶活性抑制率,初步認定為黃大茶中具有關鍵降糖活性的化合物。

(第一作者:吳悠 通信作者:宛曉春  張梁)

 

來源: 食品科學雜志

本文標題:黃大茶降血糖化合物的探究 - 黃茶_黃茶知識_黃茶的種類_黃茶的功效與作用
本文地址:http://www.xxt03.com/fenlei/huangcha/17383.html

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